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蛋白结晶与共晶

成都先导具有开展针对几千种结晶条件进行高通量筛选的专长和自动化设备,通过世界级的同步辐射装置,如上海同步辐射光源和日本兵库县的Spring-8 同步辐射光源,我们可以收集到靶蛋白本身或配体结合的靶蛋白复合物的高分辨率结构数据。我们的结构生物学家会对这些数据进行处理,然后以适于计算机建模的方式展示所解析的结构。


常规晶体学实验过程:

步骤一,结晶筛选 (识别晶体生长的条件)

  • 使用高通量结晶机器人(MosquitoTM LCP), 节省时间和样品,初始的筛选条件设为1000-2000个,可选择采用不同的温度

  • 自动化晶体观察站 (UVEX-ps256, Jansi) 用于晶体评估

  • 室内X-射线光源 (Bruker D8 VENTURE with METAJET and CPAD) 用于日常衍射实验


步骤二,结晶优化 (多维度优化晶体生长条件)

  • 关联实验条件与晶体形态

  • 结晶条件的重复和多维度优化

  • 对粗筛的晶体通过精细筛选,和使用添加剂、晶种等进一步优化


步骤三,蛋白/配体共晶结构测定

  • 数据收集之前,将目标蛋白与配体(主要来自成都先导DEL筛选或优化出的小分子化合物或者客户的化合物)共结晶,或将它们浸入到蛋白晶体里以期获得共晶样品

在工业级同步辐射光源线站(SSRF or Spring-8)的数据收集频率大约每月或每两周一次,以确保获得高分辨率的晶体结构。

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